那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)的原理:
SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)是一種用于根據(jù)蛋白質(zhì)混合物的大小分離其成分的分析方法。
該技術(shù)基于這樣的原理,即帶電分子將在電場(chǎng)中朝具有相反符號(hào)的電極遷移。常規(guī)電泳技術(shù)不能用于確定生物分子的分子量,因?yàn)槲镔|(zhì)在凝膠中的遷移率取決于電荷和大小。
為了克服這個(gè)問(wèn)題,需要對(duì)生物樣品進(jìn)行處理,以使其獲得均勻的電荷,然后電泳遷移率主要取決于尺寸。對(duì)于這種具有不同形狀和大小的蛋白質(zhì)分子,需要進(jìn)行變性(在SDS的幫助下完成),以使蛋白質(zhì)失去二級(jí),三級(jí)或四級(jí)結(jié)構(gòu)。被SDS覆蓋的蛋白質(zhì)帶負(fù)電,并在上樣時(shí)凝膠并置于電場(chǎng)中,它將朝著陽(yáng)極(帶正電的電極)遷移,并通過(guò)基于分子篩分作用的大小分開(kāi)。通過(guò)染色(蛋白質(zhì)特異性)技術(shù)進(jìn)行可視化后,可以通過(guò)將蛋白質(zhì)的遷移距離與已知分子量階梯(標(biāo)記)的遷移距離進(jìn)行比較來(lái)計(jì)算蛋白質(zhì)的大小。
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