那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下關(guān)于核酸印跡:
核酸印跡是一種成熟的技術(shù),用于鑒定先前在凝膠中分離的特定核苷酸序列的存在。(
Southern印跡以其**者英**生物學(xué)家Edwin Southern命名。在Southern印跡中,分析DNA,在Northern印跡中如果是RNA。在這兩種情況下,來自完整凝膠的DNA或RNA都將轉(zhuǎn)移到一塊硝酸纖維素膜或尼龍膜上。然后將膜暴露于雜交探針,即具有特定序列的單個DNA片段,要確定其在靶DNA(或RNA)中的存在。對探針DNA進(jìn)行標(biāo)記,以便可以通過射線照相,熒光或化學(xué)發(fā)光法對其進(jìn)行檢測。
印跡是核酸從凝膠到膜的轉(zhuǎn)移,這通常使用毛細(xì)管轉(zhuǎn)移方法完成。在此過程中,將凝膠放置在紙芯的頂部,該紙芯浸入包含轉(zhuǎn)移緩沖液的容器中。膜夾在凝膠和一堆吸收性材料(通常是干紙巾)之間,該吸收性材料通過毛細(xì)管作用使轉(zhuǎn)移緩沖液通過凝膠。然后,凝膠中的核酸分子被緩沖液攜帶并固定在膜上。真空吸印是另一種越來越流行的吸印程序,因?yàn)樗俣雀烨一厥章屎芨?。真空印跡法還使用緩沖液流將核酸帶轉(zhuǎn)移到膜上,但是它使用真空而不是毛細(xì)管作用來創(chuàng)建該流。
一旦轉(zhuǎn)移完成,在凝膠上的所有核酸帶就被固定(印跡)在膜上,雜交過程可能開始。將膜與一小段DNA或RNA(探針)一起孵育,該DNA或RNA的序列與膜中特定的DNA或RNA序列互補(bǔ)。這允許探針與膜上的特定DNA片段雜交或結(jié)合。探針先前已被標(biāo)記,通常用放射性原子,熒光染料標(biāo)記或用酶標(biāo)記,該酶在與合適的底物孵育后會產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號。雜交后,標(biāo)記的探針允許從膜上許多不同的DNA片段中檢測目標(biāo)DNA片段。
以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于核酸印跡。
全自動凝膠成像分析系統(tǒng)ZF-288技術(shù)參數(shù):
CCD芯片 | 2592(H)×1944(V),500萬像素 |
動態(tài)范圍 | 4.5OD.16bit灰階,低于20Pg經(jīng)EB染色的雙鏈DN |
像數(shù)尺寸 | 5.7 um x4.28 um |
鏡頭 | 通透電動鏡頭, 8~48mm |
曝光時間 | 0.294ms~2000ms |
靈敏度 | 低可檢測0.01ngEB染色體DNA |
檢測信噪比 | ≥56dB |
激發(fā)光源 | 300nm透射UV、254、365nm反射UV |
透射臺 | 超亮紫外透射臺,面積200×250mm ,白光:210×260mm |
濾光片: | 標(biāo)配590nm,:兼容EB、Sybr 、GoldView等大部分熒光染料 |
軟件 | Keebio 1D 圖像分析軟件 |
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