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凝膠成像 經(jīng)典知識剖析(一)
  • 發(fā)布日期:2022-04-28     信息來源:      瀏覽次數(shù):1894
    • 那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下凝膠成像 ,經(jīng)典知識剖析(一):
      凝膠成像即對DNA或RNA膠進(jìn)行切膠、拍照、觀察、分析的實驗室類儀器,凝膠成像系統(tǒng)可以應(yīng)用于分子量計算、密度掃描、密度定量、PCR定量等生物工程常規(guī)研究。凝膠成像系統(tǒng)的基本骨架包含:CCD相機(jī),暗室和分析軟件。系統(tǒng)提供白光和紫外光以及藍(lán)光光源進(jìn)行拍攝凝膠,由系統(tǒng)自帶的圖像捕捉軟件捕捉拍攝圖像,然后由系統(tǒng)自帶的圖像分析軟件對拍攝的圖像進(jìn)行分析。
      ① 原理  
      樣品中各組分在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不一樣,以標(biāo)準(zhǔn)品或者其他的替代標(biāo)準(zhǔn)品相比較就會對未知樣品作一個定性分析。這個就是圖像分析系統(tǒng)定性的基礎(chǔ)。根據(jù)未知樣品在圖譜中的位置可以對其作定性分析,就可以確定它的成份和性質(zhì)。

      樣品對投射或者反射光有部分的吸收,從而照相所得到的圖像上面的樣品條帶的光密度就會有差異。光密度于樣品的濃度或者質(zhì)量成線性關(guān)系。根據(jù)未知樣品的光密度,通過于已知濃度的樣品條帶的光密度指相比較就可以得到未知樣品的濃度或者質(zhì)量。這就是圖像分析系統(tǒng)定量的基礎(chǔ)。采用*新技術(shù)的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均勻,*大限度的消除了光密度不均造成的對結(jié)果的影響。


      ②種 類  

      1、普通凝膠成像分析系統(tǒng):可以對蛋白電泳凝膠,DNA凝膠樣品進(jìn)行圖象采集并進(jìn)行定性和定量分析,樣品包括:EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸監(jiān)測;以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各種染色的蛋白質(zhì)凝膠如考染等。(或UV,EB和有色及可見樣品成像);
      2、化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV,EB,化學(xué)發(fā)光、紫外-熒光、有色及可見樣品成像;
      3、多色熒光成像分析系統(tǒng):成像范圍涵蓋UV,EB,化學(xué)發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見樣品;

      4、多功能活體成像分析系統(tǒng):UV,EB,化學(xué)發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像和離體組織和小型動物,及大型型動物。


      ③ 特 點

      自動對焦
      自動對焦(Auto Focus)凝膠成像分析系統(tǒng),解決了新手在拍攝凝膠照片過成中,經(jīng)常發(fā)生的被拍攝照片的亮度和對比度,焦距不準(zhǔn)使照片不清晰的問題。利用物體光反射的原理,將反射的光被相機(jī)上的傳感器CCD接受,通過計算機(jī)處理,帶動電動對焦裝置進(jìn)行對焦的方式叫自動對焦.它多分為二類:一是主動式,另一個則是被動式。
      a、主動式自動對焦:相機(jī)CCD上的紅外線發(fā)生器、超聲波發(fā)生器發(fā)出紅外光或超聲波到被攝體。相機(jī)CCD上的接受器接受反射回來的紅外光或超聲波進(jìn)行對焦,其光學(xué)原理類似三角測距對焦法,廣泛用于各種平視取景相機(jī).主動式對焦對斜面,光滑面對焦困難.對亮度大,遠(yuǎn)距離的被攝體對焦困難.這是由于發(fā)出的光被反射到其它方向,或達(dá)不到被攝體所至.主動式由于是相機(jī)主動發(fā)出光或波,所以可以在低反差、弱光線下對焦.對細(xì)線條的被攝體,對動體都能自動對焦.缺點是當(dāng)被攝體能吸收光或波時對焦困難,還會被玻璃反射故透過玻璃對焦困難。
      b、 被動式自動對焦:即直接接收分析來自景物自身的反光,進(jìn)行自動對焦的方式.這種自動對焦方式的優(yōu)點是;自身不要發(fā)射系統(tǒng)。對具有一定亮度的被攝體能理想的自動對焦,在逆光下也能良好的對焦.對遠(yuǎn)處亮度大的物體能自動對焦。但缺點是對細(xì)線條的被攝體自動對焦較困難.在低反差,弱光下的對焦困難.對動體自動對焦能力差.對含偏光的被攝體自動對焦能力差.黑色物體或鏡面的對焦能力差。主動、被動式自動對焦方式各有千秋,好在我們開創(chuàng)的凝膠成像自動對焦拍攝系統(tǒng)上有二種自動對焦方式,可以互補(bǔ)使用,自動切換,發(fā)揮其強(qiáng)項,克服其弱點。

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